口腔医学研究

作者：魏巍, 谭小容, 李慕秋, 龚忠诚, 李晨曦

单位：1.新疆医科大学第一附属医院(附属口腔医院)口腔颌面肿瘤外科 新疆 乌鲁木齐 830054;2.新疆维吾尔自治区口腔医学研究所 新疆 乌鲁木齐 830054

关键词：牙龈卟啉单胞菌,口腔鳞状细胞癌,核苷二磷酸激酶,三磷酸腺苷,嘌呤能离子通道型受体7,

基金：国家自然科学基金(编号:82360481)天山英才医药卫生领军人才(编号:TSYC202301A001)新疆医科大学第一附属医院创新团队(党字[2023]52号)新疆维吾尔自治区研究生科研创新项目(编号:XJ2024G176)

目的: 探索牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis, P.gingivalis, P.g)分泌的核苷二磷酸激酶(nucleoside diphosphate kinase, NDK)是否通过耗竭口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma, OSCC)细胞外三磷酸腺苷(Adenosine triphosphate, ATP)调控P2X7门控从而影响OSCC的恶性表型。方法: 收集2022年1月~2023年12月就诊于新疆医科大学第一附属医院(附属口腔医院)口腔颌面肿瘤外科30例患者临床资料和OSCC组织样本通过免疫组织化学染色检测OSCC组织中P.g与P2X7的表达。通过体外培养SCC 9和SCC 25细胞,培养P.g(W83型),敲除P.g(W83型)中的NDK(P.g-△NDK)后并培养,建立细胞/细菌的共培养模型(采用细胞免疫荧光观察共培养模型),加入或不加入ATP,运用CCK-8、细胞划痕、Transwell、乳酸脱氧酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放、检测P.g和P.g-△NDK对各组OSCC细胞增殖、迁移、侵袭能力及毒性的影响,并用蛋白质印迹实验验证其各组间P2X7蛋白的表达。结果: 在OSCC组织中P.g与P2X7的表达显著高于癌旁组织(P<0.0001);细胞学实验中,感染P.g的SCC9和SCC 25细胞增殖、迁移、侵袭能力增强(P<0.01),细胞毒性也增强(P<0.0001),感染P.g-△NDK后,SCC 9和SCC 25细胞增殖、迁移、侵袭能力进一步增强(P<0.01),细胞毒性减弱(P<0.0001) ;各组加入ATP后,Control组、感染P.g组及感染P.g-△NDK组的细胞增殖、迁移、侵袭能力均增强(P<0.05),细胞毒性均减弱(P<0.0001),其中感染P.g组上清液中ATP含量明显减少(P<0.05),P2X7表达与ATP含量呈正相关关系。结论: P.g分泌的NDK具有耗竭SCC 9和SCC 25细胞外ATP的能力,敲除NDK后,P2X7表达上调,从而增强其增殖、迁移、侵袭能力,并降低细胞毒性。

来源：2025年第5期

《口腔医学研究》期刊编辑部

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