口腔医学研究

作者：姚姝冉, 翁清清, 朱忆颖, 刘佳, 张颖

单位：1.上海市口腔医院 上海 201103;2.上海市颅颌面发育与疾病重点实验室 上海 201103

关键词：转录组测序,氟牙症,成釉细胞,PI3K/Akt信号通路,丝裂原活化蛋白激酶信号通路,

基金：国家自然科学基金(编号:81773369)上海市自然科学基金 (编号:16ZR1430600)

目的: 基于转录组测序(transcriptome sequencing, RNA-seq)分析氟化钠(NaF)对小鼠成釉细胞系LS8细胞基因表达的影响,分析关键差异表达基因(differentially expressed genes, DEGs),为探究氟牙症发生的致病机制提供新思路。方法: 实验分为两组,空白对照组和NaF组(1.5 mmol/L)处理LS8细胞24 h后收集样本,进行RNA-seq分析,筛选出关键DEGs,采用京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes, KEGG)对基因进行通路富集分析。通过实时荧光定量聚合酶链反应技术(real-time quantitative PCR, RT-qPCR)验证测序结果的准确性。此外,通过Western blot验证相关信号通路蛋白的表达情况。结果: NaF处理24 h后,RNA-seq共检测筛选出 DEGs共104个,其中上调基因34个,下调基因70个。KEGG富集分析结果显示,磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B (phosphatidylinositol 3-kinase/protein kinase B, PI3K/Akt)和丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)等信号通路在NaF处理后的成釉细胞中显著富集。RT-qPCR发现PI3K、Akt、MAPK mRNA表达下降(P<0.05),与RNA-seq结果一致。Western blot结果显示p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-p44/p42MAPK/ p44/p42MAPK蛋白相对表达量降低(P<0.05)。结论: PI3K/Akt、MAPK信号通路可能参与氟对成釉细胞毒性作用的调控过程。

来源：2025年第5期

《口腔医学研究》期刊编辑部

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