口腔医学研究

作者：高阳, 高林波, 史春, 吴大雷

单位：1.大连医科大学附属第二医院口腔科 辽宁 大连 116000;2.大连市友谊医院口腔科 辽宁 大连 116000;3.大连医科大学口腔医学院 辽宁 大连 116000

关键词：颅骨缺损模型,富血小板血浆,小细胞外囊泡,骨修复,

基金：辽宁省自然科学基金(编号:20180550563)

目的: 本文通过提取小鼠富血小板血浆的小细胞外囊泡(platelet-rich plasma derived small extracellular vesicles,PRP-sEV),检测PRP-sEV对成骨细胞骨标志因子的表达影响,以及体内观察PRP-sEV对小鼠颅骨缺损模型的骨修复作用,为探讨PRP-sEV对骨缺损修复研究提供依据。方法: 提取小鼠PRP-sEV,通过纳米颗粒追踪分析、透射电子显微镜以及Western blot对PRP-sEV大小、结构以及标志蛋白进行鉴定。采用PKH67检测MC3T3-E1细胞对PRP-sEV的摄取情况,Western blot检测成骨标志蛋白的表达情况。建立小鼠颅骨缺损模型,通过苏木精-伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色及Masson染色观察PRP-sEV对骨缺损修复作用,通过免疫组织化学实验检测骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein 2, BMP-2)及骨桥蛋白(osteopontin, OPN)在PRP-sEV作用的颅骨缺损模型中的表达情况。结果: 纳米颗粒追踪分析结果显示,PRP-sEV大小约为120 nm, 透射电子显微镜结果显示,PRP-sEV具有典型的脂质双分子层结构,Western blot结果显示,小细胞外囊泡阳性标志蛋白CD63、CD81、凋亡连接基因-2-相互作用蛋白X(ALG-2-interacting protein X,ALIX)均呈阳性,微囊表面标记物CD40呈阴性。PKH67检测MC3T3-E1细胞对PRP-sEV正常摄取,Western blot结果显示PRP-sEV促进成骨标志蛋白BMP-2及OPN的表达,差异有统计学差异(P<0.05)。HE染色及Masson染色结果显示,PRP-sEV可促进骨缺损的修复,免疫组织化学结果显示BMP-2及OPN在PRP-sEV作用的颅骨缺损模型的表达高于对照组,差异有统计学差异(P<0.05)。结论: PRP-SEV可以促进骨组织的修复。

来源：2025年第5期

《口腔医学研究》期刊编辑部

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