口腔医学研究

作者：刘馨远, 林玉红, 陈君兰, 黄冰冰, 李宇红

单位：1.口颌系统重建与再生全国重点实验室,口腔生物医学教育部重点实验室,口腔医学湖北省重点实验室,武汉大学口腔医(学)院 湖北 武汉 430079;2.烟台市口腔医院牙体牙髓科 山东 烟台 264000

关键词：FimH,口腔黏膜免疫,树突状细胞,肝激酶B1,口腔黏膜疫苗,

基金：国家自然科学基金(编号:81670981)

目的:探究口腔黏膜树突状细胞(dendritic cells,DCs)肝激酶B1(liver kinase B1, LKB1)表达对于应用黏膜疫苗佐剂反应的影响。方法:使用CD11ccre-GFP;LKB1fl/fl条件性敲除(conditional knockout, cKO)小鼠,同窝LKB1fl/fl小鼠作为野生型(wild type, WT)对照组。首先选6~8周龄cKO与WT小鼠各12只,流式细胞术分选小鼠口腔黏膜DCs,进行转录组高通量测序;其次使用cKO与WT小鼠各16只,建立小鼠黏膜免疫模型,在第0、2和4周用卵清蛋白(ovalbumin,OVA)模式抗原颊黏膜下注射免疫(cKO-OVA, WT-OVA),鼠伤寒沙门氏菌来源的FimH(FimH-S.typhimurium, FimH-ST)佐剂联合OVA模式抗原颊黏膜下注射免疫(cKO-OVA+FimH-ST, WT-OVA+FimH-ST)。在接种后第3周收集小鼠血清和唾液,通过免疫酶联吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测血清中OVA特异性IgG1和IgG2b、唾液中OVA特异性IgA抗体水平;在接种后第6周,使用流式细胞术检测小鼠颊黏膜和包括下颌下、颈部淋巴结的口腔引流淋巴结(draining lymph node, dLN)中各免疫细胞数目和比例。结果:cKO组口腔黏膜DCs的上调基因在基因本体论(gene ontology, GO)数据库富集到先天免疫反应、B细胞介导的免疫反应;基因集富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA)中富集到Toll样受体信号通路和mTOR信号通路。WT-OVA+FimH-ST组相对WT-OVA组血清OVA特异性IgG1和IgG2b、唾液中OVA特异性IgA抗体水平升高;黏膜局部免疫B细胞与浆细胞数目与比例升高。cKO-OVA组血清IgG1和IgG2b、唾液中IgA抗体水平较WT-OVA组升高;dLN中滤泡辅助T细胞(follicular helper T, Tfh)及B细胞比例升高(P<0.05)。但cKO-OVA+FimH-ST组相对cKO-OVA组抗体分泌水平无差异,仅表现为dLN中Tfh和B细胞增多。结论:LKB1通过DCs调控先天免疫反应和B细胞功能;FimH-ST经小鼠口腔黏膜下注射具有佐剂效应;DCs激活口腔黏膜免疫反应依赖LKB1, DCs上LKB1缺陷导致FimH-ST佐剂效应丧失。

来源：2024年第5期

《口腔医学研究》期刊编辑部

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