口腔医学研究

作者：王凯丽, 张巍巍, 李艳萍, 何丽娜, 张爽, 潘爽, 牛玉梅

单位：哈尔滨医科大学附属第一医院,哈尔滨医科大学口腔医学院牙体牙髓病科 黑龙江 哈尔滨 150001

关键词：整合素α6,牙髓干细胞,FOXO1信号通路,成牙本质向分化,

基金：国家自然科学基金(编号:81970924)

目的: 探讨沉默整合素α6(integrin α6,ITGA6)是否通过激活FOXO信号通路影响人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)的成牙本质向分化。方法: 利用课题组前期构建的ITGA6沉默慢病毒干扰hDPSCs,通过Real-time PCR和Western blot验证干扰效率,同时检测空载组(sh-NC)和ITGA6沉默组(sh-ITGA6)的FOXO信号通路活性。然后用AS1842856抑制FOXO1,经矿化诱导7 d后进行Western blot和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色来观察hDPSCs的成牙本质向分化情况。结果: Real-time PCR和Western blot结果显示构建的ITGA6沉默慢病毒能有效干扰hDPSCs中ITGA6的表达;与sh-NC组比,sh-ITGA6组FOXO1在mRNA水平表达上调(P<0.05),同时Western blot结果显示其在胞核表达量增加(P<0.05);Western blot检测成牙本质向分化标记物显示,sh-ITGA6组牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)和牙本质基质蛋白-1(dentin matrix protein-1,DMP-1)表达上调(P<0.05),经AS1842856处理sh-ITGA6后,DSPP和DMP-1表达下降(P<0.05);ALP染色结果显示,sh-ITGA6组ALP染色明显加深,经AS1842856处理sh-ITGA6后,ALP染色变浅。结论: 沉默ITGA6通过激活FOXO1信号通路促进hDPSCs的成牙本质向分化。

来源：2022年第10期

《口腔医学研究》期刊编辑部

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