口腔医学研究

作者：阮文彦, 侯宇转, 迟丹丹, 于丽丽, 段小红, 黄永清

单位：1.宁夏医科大学口腔医学院 宁夏 银川 750004; 2.军事口腔医学国家重点实验室,口腔疾病国家临床医学研究中心,陕西省口腔医学重点实验室,第四军医大学口腔医学院口腔生物学教研室 陕西 西安 710032; 3.宁夏医科大学总医院口腔医院口腔颌面外科 宁夏 银川 750004

关键词：ARHGAP29,腭突间充质细胞,RNA干扰,细胞增殖,

基金：国家自然科学基金(编号:81960197、81974145、81771052)陕西省重点研发计划重点产业创新链(群)重点项目(编号:2021ZDLSF02-13)宁夏自然科学基金(编号:2021AAC03330)宁夏医科大学总医院公立医院综合改革-重点学科建设及人才培养项目(编号:NYDZY035)宁夏医科大学总医院(自治区临床研究中心)开放课题(编号:2019209)宁夏医科大学校级项目(编号:XM2020186)

目的: 探讨ARHGAP29对小鼠腭突间充质细胞增殖能力的影响。方法: 免疫组织化学染色确定ARHGAP29在腭突组织中的表达;体外培养GD13.5小鼠腭突间充质细胞,免疫荧光染色鉴定细胞来源;合成3条Arhgap29基因特异性小干扰RNA进行体外沉默实验,利用Real-time PCR和Western blot检测沉默效率;CCK-8法检测Arhgap29基因沉默后腭突间充质细胞增殖能力的改变;实验结果采用GraphPad Prism 8.0.2软件进行统计学分析。结果: 免疫组织化学结果示ARHGAP29在GD13.5小鼠腭突组织中显著表达;免疫荧光染色结果显示Vimentin染色的腭突间充质细胞包浆着色,绿色荧光表达强,Cytokeratin染色的细胞未见有阳性表达;Real-time PCR和Western blot结果显示,相较于阴性对照组和空白对照组,实验组ARHGAP29 mRNA和蛋白表达水平明显降低,其中Arhgap29-siRNA3的沉默效果最好(P<0.001);CCK-8结果显示体外沉默Arhgap29基因48 h后腭突间充质细胞的增殖能力开始上升,转染72 h细胞的增殖能力显著增强(P<0.05)。结论: ARHGAP29可能通过促进腭突间充质细胞的增殖,在腭突发育阶段造成腭突与口腔上皮的黏连,从而影响腭部的正常发育。

来源：2022年第3期

《口腔医学研究》期刊编辑部

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