口腔医学研究

作者：何林, 何淞, 吴稀, 杨森

单位：1.遂宁市中心医院口腔医学中心 四川 遂宁 629000; 2.西南医科大学附属口腔医院 四川 泸州 646000

关键词：人根尖乳头干细胞,聚多巴胺,羟基磷灰石生物陶瓷,成骨分化,

基金：四川省科技重点研发项目(编号:2018FZ0113);中华口腔医学会西部行口腔医学临床科研基金(编号:CSA-W-2016-01);四川省科技支撑计划项目(编号:2014SZ0038);四川省医学科研青年创新课题(编号:Q14054)

目的: 提取、鉴定人根尖乳头干细胞(hSCAPs),接种于羟基磷灰石生物陶瓷(HAP)和聚多巴胺-羟基磷灰石生物陶瓷(PDA-HAP)上,对比两种支架的细胞粘附、增殖及成骨分化能力。方法: (1)改良组织块法提取hSCAPs,流式细胞仪鉴定细胞表面抗原:STRO-1、CD90、CD146、CD45、CD34。(2)hSCAPs 分别接种于HAP组和PDA-HAP组,DAPI和鬼笔环肽分别对细胞核和骨架染色,观察细胞形态,计数行统计分析。(3)hSCAPs 分别接种于HAP组和PDA-HAP组,培养1、3、5、7 d,CCK8测量A值检测细胞增殖情况。(4)hSCAPs 接种于HAP组和PDA-HAP组,培养1、7、14 d,检测ALP活性,Real-time PCR检测ALP、OCN和Runx2表达量。结果: (1)所提hSCAPs表达STRO-1(+)、CD90(+)、CD146(+)、CD45(-)、CD34(-)。(2)PDA-HAP组较HAP组上附着的hSCAPs数目更多(P<0.001),且PDA-HAP上的细胞相较HAP上的面积更大,伸展更充分,可见明显的细胞触角。(3)HAP和PDA-HAP培养hSCAPs1、3、5、7 d毒性均无明显差异(P>0.05)。(4)ALP活性:诱导第1天、14天两组活性差异无统计学意义(P>0.05),但第7天PDA-HAP组明显高于HAP组(P<0.001)。Real-time PCR:ALP的表达情况与ALP活性结果一致;Run x2于1、7、14 d均为PDA-HAP组高于HAP组,差异有统计学意义(P<0.05);OCN第1天两组差异无统计学意义(P>0.05),在第7天、14天PDA-HAP组均较HAP组高(P<0.05)。结论: PDA-HAP较HAP能明显促进hSCAPs粘附、成骨相关特异基因ALP、 Runx2、OCN的表达,促进hSCAPs成骨分化。

来源：2020年第6期

《口腔医学研究》期刊编辑部

查看口腔医学研究杂志2020年第6期