口腔医学研究

作者：王佳, 张文静, 韩祥祯, 周琦琪, 何惠宇

单位：1. 新疆医科大学第一附属医院(附属口腔医院)口腔修复科 新疆 乌鲁木齐 830054; 2. 新疆维吾尔自治区口腔医学研究所 新疆 乌鲁木齐 830054

关键词：巨噬细胞集落刺激因子,破骨细胞相关因子,破骨信号通路,骨髓间充质干细胞,骨组织工程,

基金：国家自然科学基金(编号:81660177)

目的: 探讨巨噬细胞集落刺激因子(monocyte colony-stimulating factor,M-CSF)在SD大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells ,BMSCs)中过表达对破骨细胞分化形成相关细胞因子在信号通路中表达的影响。方法: 构建过表达质粒载体上调M-CSF基因表达,使用增强型绿色荧光蛋白确定最佳转染剂量,并将质粒转染至BMSCs。采用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcriptase polymerase chain reaction,RT-PCR)检测破骨分化特异标志物 M-CSF、核因子-κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor-kappaB ligand,RANKL)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)、白细胞介素-1(interleukin-1,IL-1)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-24(interleukin-24,IL-24)的mRNA 表达水平。结果: 流式鉴定BMSCs 表面标记物CD29、CD44阳性率为91.4%、85.7%;CD45阳性率为2%;每孔5 μL LTX®为最佳转染效率;RT-PCR检测结果显示,实验组BMSCs中M-CSF mRNA表达显著升高(P<0.001);BMSCs破骨分化特异标志物RANKL、TNF-α、IL-1 、IL-24 mRNA表达均显著增高(P<0.001),IL-6 mRNA表达降低(P<0.001),实验组与对照组比较差异有统计学意义。结论: M-CSF过表达增强BMSCs向破骨细胞分化的能力,对破骨细胞形成分化的早中晚期均存在影响。此外,M-CSF高表达质粒将外源基因导入BMSCs,是一种强有力的骨再生的基因治疗工具。

来源：2019年第11期

《口腔医学研究》期刊编辑部

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